Dispositifs de collecte et de préservation de l'ARN de la salive

Aperçu du produit

Les dispositifs de collecte et de préservation d'ARN de la salive de Norgen sont conçus pour 1) une collecte simple et non invasive de la salive et 2) la conservation d'ARN dans les échantillons de salive à température ambiante. Chacun des 50 dispositifs de collecte et de conservation d'ARN de la salive est composé de trois éléments : (1) entonnoir et tube de prélèvement de salive, (2) bouchon du tube de prélèvement, et (3) conservateur d'ARN de salive de Norgen contenu dans une ampoule compressible scellée. Les échantillons de salive sont recueillis en crachant à l'intérieur de l'entonnoir de collecte qui a été assemblé avec le tube de collecte. Après avoir recueilli le volume de salive nécessaire, l'entonnoir de collecte est retiré et le contenu de l'ampoule de conservation est ajouté et mélangé à la salive recueillie. Le tube de prélèvement de salive est ensuite envoyé au laboratoire pour l'isolement et l'analyse de l'ARN. L'ARN peut être isolé à partir des échantillons de salive conservés à l'aide des kits de purification de l'ARN de la salive/du tampon de Norgen (Cat# 69100, 69300). Chaque tube de collecte Norgen est étiqueté avec un numéro de série unique qui peut être utilisé pour un suivi sécurisé et anonyme de l'échantillon. L'ARN de la salive dans les échantillons conservés est stable jusqu'à 2 mois à température ambiante. Ce kit est idéal pour la collecte et la conservation d'échantillons d'ARN dans le cadre d'études épidémiologiques et démographiques.

CONSERVATEUR D'ARN SALIVAIRE

Le conservateur d’ARN salivaire de Norgen est un tampon de stockage aqueux conçu pour la lyse cellulaire rapide et la préservation ultérieure de l’ARN à partir de spécimens frais. Le tampon élimine la nécessité de traiter ou de congeler immédiatement les échantillons et permet de les expédier à température ambiante vers des installations d'essai centralisées. Les composants du tampon permettent de conserver les échantillons jusqu'à 2 mois à température ambiante.

ISOLATION DE L'ACIDE NUCLÉIQUE À PARTIR D'UN CONSERVATEUR

L'ARN de la salive peut être isolé à partir des échantillons de salive conservés à l'aide des kits de purification d'ARN de la salive/du tampon de Norgen (Cat# 69100, 69300).

Détails

Données justificatives

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Figure 1. Stabilité de l'ARN conservé dans le conservateur d'ARN de la salive de Norgen à température ambiante jusqu'à 2 mois. Des échantillons de salive ont été prélevés sur de nombreux donneurs et mélangés, puis un volume égal de conservateur d’ARN salivaire de Norgen a été ajouté à la salive. La salive conservée a ensuite été stockée à température ambiante pendant 2 mois. L'ARN salivaire a ensuite été isolé au jour 0, au jour 4, au jour 6, au jour 16, au mois 1 et au mois 2 à partir de 0,25 ml de l'échantillon de salive/préservation en utilisant le protocole supplémentaire associé au kit de purification d'ARN total de Norgen (Cat. 17200). Pour l'analyse visuelle, 7,5 µL de l'élution de 50 µL ont été mélangés à un colorant de chargement de l'ARN et ont été passés sur un gel d'agarose MOPS 1x. L'intégrité de l'ARN a été maintenue après que les échantillons de salive ont été conservés jusqu'à 2 mois à température ambiante dans le conservateur d’ARN salivaire de Norgen.

Figure 2. Stabilité de trois gènes ménagers sur une période de deux mois. Les gènes de la GAPDH, de l'ARNr 18S humain et de la bêta-actine ont été contrôlés à partir d'échantillons de salive conservés à température ambiante avec le conservateur d'ARN salivaire de Norgen. L'ARN a été isolé à partir de 250 µL d'échantillons conservés au jour 0, au jour 4, au jour 6, au jour 10, au jour 16, au jour 30 et au jour 60 à l'aide du kit de purification de l'ARN total de Norgen (Cat. 17200). Ensuite, 4 µL d'élution ont été utilisés dans 20 µL de réaction PCR en temps réel (SYBR Green I) en utilisant le système de détection PCR en temps réel CFX96 TouchTM (Bio-Rad). Tous les gènes ont été préservés et sont stables sur une période de deux mois.

Figure 3. Le conservateur d'ARN de salive de Norgen est capable de préserver avec succès les échantillons d'ARN de salive lorsqu'il est utilisé en dehors de la gamme idéale de 1:1 à température ambiante pendant 3 jours. Lorsque la quantité de salive ajoutée à 2 mL de conservateur d’ARN salivaire est passée de 0,2 mL jusqu'à 3 mL, la protéine RNase et le gène β-actine ont été contrôlés pour la stabilité de l'ARN à l'aide d'une RT-PCR en une étape. Les résultats indiquent que la variation des volumes d'entrée de salive n'a pas influencé de manière significative la détection des gènes ARN.

Figure 4. Détection d'ARN viral, bactérien et humain à partir d'échantillons de salive conservés. La salive (2 ml) prélevée sur un seul donneur sain a été mélangée à 2 mL de conservateur d'ARN salivaire. Le contrôle positif du kit 2019-nCoV TaqMan RT-PCR ( gène E/RdRP) (Cat. TM67200) de Norgen a été ajouté à la salive conservée avec des cellules HeLa (1,6 m de cellules /mL) pour créer un échantillon artificiel. À partir de l'échantillon artificiel, l'ARN total a été purifié à l'aide du kit de purification de l'ARN total de Norgen (Cat. 17200) et 5 gènes (ARNr 16s, gène COVID-19 E, gène RdRP-P1 et P2 et RP) ont été analysés par PCR ou RT-PCR pour détecter les gènes viraux, bactériens et humains.

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