Aperçu du produit

Ce kit constitue d'une méthode pratique et rapide pour isoler l'ADN total à partir d'échantillons de selles frais, congelés et conservés, y compris ceux conservés à l'aide des dispositifs de collecte et de conservation de l'acide nucléique des selles Dx de Norgen (Cat. Dx45660). Le protocole universel permet d'isoler simultanément l'ADN génomique total de tous les micro-organismes et cellules hôtes présents dans l'échantillon de selles. Le kit élimine toutes les traces d'acides humiques et d'autres inhibiteurs à l'aide de tubes à billes et d'une combinaison d'homogénéisation et de lyse chimiques et physiques, sans qu'il soit nécessaire de procéder à des extractions au phénol-chloroforme. Une procédure simple et rapide de colonne de spin est ensuite utilisée pour purifier d'avantage l'ADN avec des rendements élevés et des poids moléculaires allant jusqu'à 50 kb plus. L'ADN purifié est de la plus haute qualité et est entièrement compatible avec toutes les applications en aval telles que la PCR, la qPCR, la NGS et les puces à ADN, car toutes les substances d'acide humique et autres inhibiteurs de la PCR sont éliminés au cours du processus d'isolation.

REMARQUE : Ce produit n'est pas disponible pour vente dans les États-Unis.

Détails

Données justificatives

Figure 1. Rendements d'ADN supérieurs à ceux du concurrent Z. L'ADN des selles a été isolé à partir de 200 mg d'échantillons de selles fraîches à l'aide du kit d'isolation de l'ADN des selles Dx de Norgen et du kit du concurrent Z. Pour l'évaluation, 10 µl d'ADN provenant de l'élution ont été analysés sur un gel d'agarose 1X TAE 1,2 %. Le kit de Norgen a permis d'isoler des quantités beaucoup plus importantes d'ADN. Marqueur = échelle d'ADN HighRanger de Norgen.

Figure 2. ADN de meilleure qualité que celui du concurrent Z. L'ADN des selles a été isolé à partir de 200 mg d'échantillons de selles fraîches à l'aide du kit d'isolement de l'ADN des selles Dx de Norgen et du kit du concurrent Z. La qualité de l'ADN a ensuite été mesurée par Nanodrop. Le kit d'isolement de l'ADN des selles de Norgen Dx a permis d'isoler un ADN de la plus haute qualité.

Figure 3. ADN de haute qualité confirmé par PCR en temps réel.L'ADN des selles a été isolé à partir de 200 mg d'échantillons de selles fraîches à l'aide du kit d'isolement de l'ADN des selles Dx de Norgen et du kit Z du concurrent. La qualité de l'ADN a été confirmée par PCR en temps réel en utilisant 4 µl d'ADN de selles (le volume total de la réaction PCR était de 20 µl) pour détecter l'ARNr 16S à partir de différents échantillons de selles. La valeur Ct plus précoce avec les échantillons d'ADN de Norgen (lignes bleues) par rapport aux échantillons du concurrent Z (lignes rouges) indique une meilleure qualité de l'ADN de selles pour les applications en aval.

Figure 4. Classifications taxonomiques de 10 microbiomes fécaux.A) Analyse en coordonnées principales de 10 microbiomes fécaux montrant des différences dans la distribution des classifications taxonomiques entre les échantillons jusqu'au niveau de la classe. B) Regroupement hiérarchique de 10 microbiomes fécaux sur la base de classifications au niveau du genre, y compris un diagramme à barres montrant l'abondance relative des classifications au niveau du genre pour chaque échantillon dans le dendrogramme.

Spécifications du kit
Apport maximal de selles	200 mg (selles fraîches/congelées) ou 400 μL (selles conservées)
Type de selles traitées	Selles congelées, fraîches ou conservées
Format	Colonne de spin
Capacité de liaison maximale de la colonne	50 μg
Volume maximal de chargement de la colonne	650 μL
Volume d'élution	50 μL
Temps nécessaire pour effectuer 10 purifications	30 minutes
Applications	PCR, qPCR, analyse de transfert de Southern, séquence, analyse des puces à ADN.

Conditions de stockage et stabilité du produit
Toutes les solutions doivent être maintenues hermétiquement fermées et conservées à température ambiante. Ce kit est stable pendant 2 ans après la date d'expédition.