cf-DNA/cf-RNA 保存管 Dx

图 2.运输后血浆容量不会损失。从 6 名不同的献血者身上抽血，一式两份。一套保存在室温下的实验室中，另一套装在保温箱中，通过隔夜空运从安大略省索罗尔德市运往密歇根州温尼伯市，然后再运回安大略省索罗尔德市（经过 72 小时）。回国后，保存的样本在室温下存放 7 天，然后再分离血浆。从 Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存剂试管中回收的血浆量在运输前和运输后都没有变化（6-7 mL 回收血浆）。对于竞争对手试管和 EDTA 试管，运输前回收的血浆量约为 4 mL，运输后回收的血浆量约为 2.5 mL。

图 3.随时间测量采集血液的溶血情况。血液样本被抽取到1) EDTA 管；2) 竞争对手试管；3) Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存剂试管，并可保存 30 天。溶血是通过测量 3 名受试者血浆中游离血红蛋白在 414 nm 波长下的吸收率来确定的。显示的是平均吸收率。EDTA 管和竞争对手试管中的游离血红蛋白量每增加一天就会迅速增加，而 Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存剂试管中的游离血红蛋白量则保持相对稳定。

图 4.防止细胞裂解、gDNA 释放和血浆中凋亡梯的积累。将抽取的血样放入三种不同的试管（Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存剂试管、EDTA 和竞争对手试管）中，并保存长达 30 天。Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存剂试管有助于防止高分子量 gDNA 释放到血浆中，同时最大限度地减少外周血白细胞凋亡产生的污染性凋亡梯的积累。如黑色圆圈所示，与竞争对手试管和 EDTA 试管相比，gDNA 污染水平非常低。这表明细胞裂解程度很低，随后 gDNA 释放到保存的血浆样本中。

图 5.高温（37°C）储存 8 天的影响。将血样抽取到 EDTA 管、竞争对手管或 Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存管中并储存在 37°C 下。然后从处理后的血浆中分离出 cf-DNA。使用长 ALU 基因靶标 (247 bp) 通过实时聚合酶链式反应 测定 gDNA 浓度。EDTA 管中的 gDNA - 目标物在 37°C 下储存 1 天后，Ct.值较初始时间点明显下降，并持续下降至第 8 天。对于竞争对手，gDNA - 目标物在储存第 4 天前保持稳定，然后 Ct 值开始显著下降，表明第 4 天后稳定性较差。Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存剂试管可使样本稳定 8 天。

图 6.使用 Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存剂试管保存血浆中的大量 cf-DNA。将同一供血者的血液样本抽入竞争对手试管或 Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存剂试管中，并在室温下保存 7 天。Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存剂试管回收了 6.5 mL 血浆，而竞争对手的试管回收了 3.5 mL 血浆。然后使用 Norgen 的血浆/血清无细胞循环 DNA 纯化 Midi 试剂盒（类别号：55600）和 Norgen 的血浆/血清无细胞循环 DNA 纯化 Maxi 试剂盒（类别号：55800）。使用安捷伦生物分析仪高灵敏度 DNA 芯片对从两种样本中回收的 DNA 数量进行了评估。从生物分析仪的检测结果可以看出，与从竞争对手的保存剂试管中回收的 cf-DNA 相比，Norgen 的保存剂试管产生了更多的 cf-DNA（蓝色峰值）。

图 7.环境温度储存对 cf-RNA 的影响，以 18S rRNA 转录本、HPRT1 mRNA 转录本和 miR-21 为例。抽取的血液样本分为两种：1) 竞争对手试管或 2) Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存剂试管。竞争对手的试管在室温下可保存 14 天，而 Norgens cf-DNA/cf-RNA 保存剂试管在室温下可保存 30 天。在指定时间处理每个试管并分离血浆。分离出 Cf-RNA，并通过针对 18S rRNA 转录本、HPRT1 mRNA 转录本和 miR-21 的 rt-qPCR 扩增测定纯化的 cf-RNA 的稳定性。这三个目标的水平应在稳定期间保持不变。7 天后，竞争对手的三个靶标的 Ct 值明显升高，表明 cf-RNA 降解，而 Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存剂试管在室温条件下，cf-RNA 可稳定 30 天。